2結(jié)果與分析

2.1前處理過程的確定

根據(jù)GB/T 18246—2019中的前處理過程，對部分操作進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化，經(jīng)過試驗驗證，水解管不需在冷凍環(huán)境下進(jìn)行充氮操作，只需用氮氣趕盡管中的空氣，因此直接將水解管置于氮氣下充氮3 min即可；水解后分取的樣液僅為0.1 m L，可直接在氮氣下吹干，對實驗室內(nèi)環(huán)境不會造成太大污染，樣液在氮氣下吹干后，使用適合質(zhì)譜儀的0.1%甲酸水溶液進(jìn)行復(fù)溶，能夠減小溶劑效應(yīng)對試驗結(jié)果的干擾。

2.2 16種氨基酸的線性方程和檢出限（見表3)

將1.2中的16種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成濃度在0.01～50.00μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，上機(jī)進(jìn)行測定，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度作為橫坐標(biāo)x（μmol/L），以峰面積作為縱坐標(biāo)y建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。由表3可知，16種氨基酸在0.01～50.00μmol/L范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.990 0。

以3倍的性噪比（S/N）所對應(yīng)的質(zhì)量作為檢出限，結(jié)果顯示16種氨基酸所能達(dá)到的檢測低限為1～10 ng/g。

2.3 16種氨基酸的重復(fù)性測試（見表4)

稱取同一樣品共6份，按照1.3.4前處理方法制備樣液，在試驗條件下進(jìn)行測定，以出峰時間計算定性重復(fù)性，以氨基酸含量計算定量重復(fù)性。由表4可知，16種氨基酸的定性重復(fù)性在0.02%～0.12%之間，定量重復(fù)性在0.11%～0.94%之間，表明方法具有較好的精密度。

2.4 16種氨基酸的回收率測試（見表5)

選用采購自美正公司的魚粉質(zhì)控樣品，樣品中16種氨基酸的量值及其擴(kuò)展不確定度均為已知，按前處理過程處理試樣，上機(jī)測定后計算回收率。由表5可知，16種氨基酸的回收率在97.3%～104.0%之間，實測結(jié)果與質(zhì)控樣標(biāo)示量值的相對偏差均在2.0%以下，表明方法回收率良好。

2.5實際樣品測定結(jié)果

選用配合飼料、濃縮飼料、魚粉、肉粉等不同種類的樣品共8份，采用GB/T 18246—2019與本方法同時對8份樣品中16種氨基酸進(jìn)行測定，結(jié)果表明，16種氨基酸的相對偏差均在5%以內(nèi)，證明本方法測得結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

3結(jié)論

研究基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀定性準(zhǔn)確、檢測效率高等特點，通過優(yōu)化樣品前處理過程和液相色譜-質(zhì)譜條件，建立能夠同時測定飼料中16種氨基酸的檢測方法。本方法處理過程簡單、易操作，經(jīng)試驗證實檢出限低、靈敏度高、精密度良好、回收率、準(zhǔn)確度高。與檢測用時較長的氨基酸分析儀相比，能夠縮短分析時間、提高檢測效率。研究為飼料中16種常規(guī)氨基酸含量的檢測提供參考。

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