(3)規(guī)范曲線方程
選用明確的色譜儀標(biāo)準(zhǔn),各自對不一樣濃度值索馬甜標(biāo)液開展測量,以規(guī)范溶液的濃度為橫坐標(biāo)軸,相匹配的峰總面積為縱軸,創(chuàng)建標(biāo)曲,結(jié)果如圖所示3所顯示。所得的索馬甜規(guī)范曲線方程為Y=3.62568X-47.04715,相關(guān)系數(shù)r為0.9983,說明在10~500mg/L濃度值范疇內(nèi)其線性相關(guān)優(yōu)良。
(4)方法檢出限及定量限
反復(fù)測量20次含有10mg/L索馬甜的栽培基質(zhì)試品,以結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍測算出方式的方法檢出限為1.6mg/L,以結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍測算出定量限為5.3mg/L,說明該辦法能達到食品類中甜味素的檢查規(guī)定。
(5)利用率和精度
選用文中所確立的辦法對市面上的15個批號的飲料類商品(包含炭酸類飲品可口可樂、可樂,茶類飲料綠茶、綠茶葉、花草茶,果肉飲料,維他命飲品)開展剖析檢驗,均未發(fā)覺索馬甜的驗出,與其說商品標(biāo)簽成份中未明確應(yīng)用索馬甜的狀況一致。
為認(rèn)證辦法的可行性分析,進一步對飲品試品開展加標(biāo)實驗。在這里全過程發(fā)覺,立即向各種飲品中添加索馬甜,均沒法驗出,剖析其根本原因可能是因為各種飲品中高濃的糖成分造成蛋白質(zhì)聚沉所致使的,因而,加標(biāo)回收實驗均是在對飲品開展10倍稀釋液后的根基上加上。不一樣試品的索馬甜加標(biāo)實驗超高效率液相色譜儀結(jié)果如圖4所顯示,索馬甜加標(biāo)回收率及精度實驗結(jié)果見表1。
依據(jù)表1結(jié)果,不一樣試品索馬甜加標(biāo)回收率在82.8%~102.3%,相對性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均在6%之內(nèi),說明該辦法有著優(yōu)良的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
2、SDS-PAGE統(tǒng)計分析方法的創(chuàng)建
SDS-PAGE是剖析蛋白常見的方式 ,可以完成判定及半定量分析。配置不一樣含量的索馬甜蛋白質(zhì)水水溶液,其SDS-PAGE結(jié)果如圖所示5所顯示。
由圖5能夠看得出,索馬甜蛋白質(zhì)雜帶超出20kD,與資料中消息的相對分子質(zhì)量22kD尺寸符合,伴隨著含量的擴大雜帶色調(diào)慢慢加重、雜帶變大,在其中濃度值為10mg/L時,蛋白質(zhì)雜帶若隱若現(xiàn),濃度值為提升至25mg/L時,雜帶已更為清楚、顯著,不難看出,SDS-PAGE法達到GB2760-2014較大容許需求量0.025g/kg的剖析規(guī)定。
對各種飲品開展10倍稀釋液后任意加上不一樣濃度值索馬甜標(biāo)液,依照上述情況的電泳分析方式實現(xiàn)解決并電泳原理,其效果如圖所示6所顯示。由圖上能夠看得出,各加標(biāo)試品電泳條帶與索馬甜規(guī)范試品一致,不難看出運用SDS-PAGE法可以完成對飲品中索馬甜開展剖析。
三、結(jié)果
本畢業(yè)論文各自根據(jù)超高效液相色譜色譜分析和SDS-PAGE法創(chuàng)建了飲品中索馬甜的剖析測試標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)試品加標(biāo)試驗,結(jié)果顯示這兩種方式均可完成對飲品中索馬甜的檢驗,其敏感度都可以達到GB2760-2014中較大限制值應(yīng)用的檢查規(guī)定。除此之外,針對比較繁雜的栽培基質(zhì)試品,根據(jù)選用這兩種辦法開展互相證明,可以得到更加穩(wěn)定的結(jié)果。