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海洋細(xì)菌MicrobacteriumesteraromaticumMCDA02產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶發(fā)酵條件優(yōu)化(三)

來源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 15:06:20 關(guān)注: 0 次
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(4)裝液量對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害裝液量對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示10,裝液量小于20%時(shí),伴隨著裝水率的提升,菌種的產(chǎn)酶量慢慢上升,當(dāng)裝水率做到20%時(shí),產(chǎn)酶量做到最大。裝液量再次擴(kuò)大,菌種MCDA02的產(chǎn)酶量減少。
 

(5)接種量對菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA的危害接種量對菌種MCDA02生長發(fā)育的危害如圖所示11,接種量在0.5%~4%中間時(shí)菌種都能比較好房地產(chǎn)酶,相對性酶活做到70%之上。接種量為1%時(shí),菌種相對性酶活最大。
 

(5)響應(yīng)面提升發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

從單要素中選擇氮源、碳酸鹽和發(fā)醇培養(yǎng)液原始pH三個(gè)要素為自變量,應(yīng)用DesignofExperiments開展三要素三水準(zhǔn)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì),總共1七個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的Box-Behnken響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)(表2)。實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)與響應(yīng)值結(jié)果,如表3。

應(yīng)用DesignofExperiments開展方差分析和多元回歸分析(表3),線性擬合獲得線性回歸方程如下所示:

Y=-52.244 8.9515*A 279.125*B 10.807*C-30.5*A*B-0.64*A*C-2l*B*C-1.107*A2-817.5*B2-0.577*C2

由表4得知:實(shí)體模型P<0.01,說明該方程式實(shí)體模型極明顯,不一樣解決間的差異極明顯;失擬項(xiàng)P>0.05,說明實(shí)體模型失擬項(xiàng)不明顯l從F值的多少能夠獲得,一次項(xiàng)中各要素對幾丁質(zhì)脫乙酰酶酶活的危害次序是C>A>B,互動相對性酶活危害的層次次序?yàn)锳C>AB>BC。實(shí)體模型的R2為0.9512,表明該實(shí)體模型能表述95.12%響應(yīng)值的轉(zhuǎn)變,因此該實(shí)體模型擬合程度優(yōu)良,試驗(yàn)誤差小,能夠用以預(yù)測分析最佳發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)主要參數(shù)。結(jié)果顯示,最好發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)為:木薯淀粉1.09%、ZnS040.05%、pH7.86,預(yù)估酶活2.01U/mL。聯(lián)系實(shí)際,大家將發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)為木薯淀粉1.1%、ZnSO40.05%、pH7.9。歷經(jīng)中后期認(rèn)證測出酶活2.06U/mL。與預(yù)估基本上合乎。比提升以前增強(qiáng)了1.41倍。提升后菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)CDA水準(zhǔn)為2.06U/mL,小于一部分報(bào)導(dǎo)的病菌發(fā)醇幾丁質(zhì)脫乙酰酶的發(fā)醇水準(zhǔn)。

三、結(jié)果

從高公島收集的海泥中,挑選得到了3株產(chǎn)幾丁質(zhì)脫乙酰酶菌種,菌種MCDA02發(fā)醇產(chǎn)酶水準(zhǔn)最大。根據(jù)組織學(xué)特點(diǎn)、生理學(xué)生物化學(xué)特點(diǎn)及16SrDNA剖析將菌種MCDA02評定為Microbacteriumesteraromaticum。提升得到了菌種MCDA02的較佳發(fā)醇標(biāo)準(zhǔn),提升后酶活為2.01U/mL,較提升前酶活1.43U/mL,提升 了1.41倍。

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