2.3 塑造標(biāo)準(zhǔn)對解木薯淀粉枯草芽孢菌F3菌種纖維素酶活力的危害

2.3.1 塑造時(shí)間的危害

F3菌種經(jīng)LB液體培養(yǎng)基活性后，按4%接種量注射至LB液體培養(yǎng)基，37℃連續(xù)培養(yǎng)72h，不一樣時(shí)間點(diǎn)的纖維素酶活力結(jié)果如圖所示5所顯示。

由圖5得知，伴隨著培育時(shí)間的增加，F(xiàn)3菌種纖維素酶活力呈持續(xù)上升發(fā)展趨勢，48h時(shí)酶促反應(yīng)最大，纖維素酶魅力為15.97U/mL，接著纖維素酶活力呈下降趨勢，故最好塑造時(shí)間確認(rèn)為48h，這有別于別的科學(xué)研究新聞報(bào)道中枯草芽孢菌纖維素酶魅力最好塑造時(shí)間3d～4d。

2.3.2 塑造溫度的危害

活性的F3菌種按4%接種量注射至LB液體培養(yǎng)基，不一樣塑造溫度下F3菌種纖維素酶魅力的轉(zhuǎn)變結(jié)果如圖所示6所顯示。伴隨著氣溫的上升，F(xiàn)3菌種產(chǎn)纖維素酶的魅力呈先升高再降低的發(fā)展趨勢，在其中仍然以37℃塑造溫度標(biāo)準(zhǔn)下酶魅力最大，但35℃與37℃二種塑造溫度對F3菌種纖維素酶魅力的危害差別不明顯（p＞0.05），其產(chǎn)纖維素酶的最好塑造溫度與別的科學(xué)研究報(bào)導(dǎo)的解木薯淀粉枯草芽孢菌存有很大差別，表明溫度對解木薯淀粉枯草芽孢菌纖維素酶魅力的危害具備非常明顯的菌種非特異。

2.3.3 接種量的危害

F3菌種經(jīng)活性后，各自按不一樣接種量注射至LB液體培養(yǎng)基中37℃塑造48h，纖維素酶魅力檢驗(yàn)結(jié)果如圖所示7所顯示。接種量為6%時(shí)，F(xiàn)3菌種的纖維素酶魅力最大為17.62U/mL，但與4%接種量時(shí)其酶魅力差別不明顯（p＞0.05），這與別的科學(xué)研究報(bào)導(dǎo)相近。

2.3.4 培養(yǎng)液原始pH對F3菌種纖維素酶活力的危害

活性的F3菌種各自按6%接種量注射至不一樣原始pH的LB液體培養(yǎng)基中，37℃塑造48h，纖維素酶魅力檢驗(yàn)結(jié)果如圖所示8所顯示。

由圖8得知，培養(yǎng)液原始pH對F3菌種產(chǎn)纖維素酶的魅力危害明顯，在其中以原始pH為pH7.0時(shí)纖維素酶魅力最大，達(dá)18.22U/mL，顯著高過其他原始pH時(shí)菌種生產(chǎn)的纖維素酶魅力（p＜0.05）。除此之外，從不一樣原始pH標(biāo)準(zhǔn)下菌種的發(fā)育情況看，原始pH為pH11.0時(shí)，F(xiàn)3菌種的細(xì)胞培養(yǎng)液相對性回應(yīng)，這表明F3菌種不合適在pH11.0的酸性標(biāo)準(zhǔn)生長發(fā)育，這也致使了此標(biāo)準(zhǔn)下其產(chǎn)酶工作能力較弱。對比于pH7.0標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)3菌種在pH3.0的酸堿性情況下漲勢都不強(qiáng)，但仍具備一定的酶促反應(yīng)，而何頌捷等報(bào)導(dǎo)的解木薯淀粉枯草芽孢菌在pH3.0的原始pH下無法生長發(fā)育，故無纖維素酶活力。從而表明，F(xiàn)3菌種比較適合在弱酸性情況下生長發(fā)育。

2.4 解木薯淀粉枯草芽孢菌F3產(chǎn)纖維素酶標(biāo)準(zhǔn)提升

依據(jù)單要素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，依照表1中選定的要素及水準(zhǔn)，開展正交實(shí)驗(yàn)提升，結(jié)果如表2所顯示。4種要素對F3菌種產(chǎn)纖維素酶魅力的危害尺寸次序先后為：培養(yǎng)液原始pH＞塑造時(shí)間＞塑造溫度＞接種量，纖維素酶魅力提升的最好組成為A₂B₂C₂D₃。依照最好搭配的培育標(biāo)準(zhǔn)開展塑造，即LB液體培養(yǎng)基的原始pH調(diào)為pH7.0，按6%接種量注射F3菌種，在37℃塑造溫度下連續(xù)培養(yǎng)60h，解木薯淀粉枯草芽孢菌F3菌種細(xì)胞培養(yǎng)液中纖維素酶魅力可以達(dá)到21.14U/mL，對比于正交實(shí)驗(yàn)提升前最大酶活提升了16.03%。F3菌種生產(chǎn)纖維素酶的魅力顯著高過林曉瓊等報(bào)導(dǎo)的解木薯淀粉枯草芽孢菌，具備不確定性的使用使用價(jià)值。

3 結(jié)果

從大自然中發(fā)掘具備纖維素酶活力的微生物資源有著關(guān)鍵實(shí)際意義。原文中從發(fā)醇水豆豉中分開到一株可產(chǎn)纖維素酶的解木薯淀粉枯草芽孢菌綠色植物亞種F3菌種，根據(jù)單要素及正交實(shí)驗(yàn)提升了其液態(tài)塑造的最好產(chǎn)酶標(biāo)準(zhǔn)，即塑造溫度37℃、接種量6%、原始pH為pH7.0、發(fā)酵時(shí)間60h，纖維素酶魅力可以達(dá)到21.14U/mL。