2、單因素實(shí)驗(yàn)

（1）酸醇比對(duì)PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、提取時(shí)間50min、料液比為1:30、提取次數(shù)1次、沉淀pH=7的條件下，考察酸醇比對(duì)PA提取效果的影響，結(jié)果見圖5。

如圖5所示，隨著酸的濃度增加，PA的含量與回收率均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，在1.2:100處達(dá)到最高。當(dāng)酸醇比小于1.2:100時(shí)，酸醇對(duì)PA的選擇性強(qiáng)于磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol，簡(jiǎn)稱為PE）和磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine，簡(jiǎn)稱為PE)，故PA含量與回收率會(huì)隨著酸的增加而上升。當(dāng)酸醇比大于1.2:100后，酸醇對(duì)PA的選擇性達(dá)到峰值，對(duì)PI與PE的選擇性卻增加，PA的含量與回收率均下降，PA的最佳酸醇比為1.2:100。

（2）時(shí)間對(duì)PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、酸醇比1.2:100、料液比為1:30、提取次數(shù)1次、沉淀pH=7的條件下，考察提取時(shí)間對(duì)PA提取效果的影響，結(jié)果見圖6。

如圖6所示，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，產(chǎn)品中PA的含量逐漸增加，于70min趨于平衡，而PA回收率卻在70min后增長(zhǎng)變緩。當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到70min，原料中的大部分PA已被酸醇萃取出來(lái)，PA回收率趨于平衡。提取時(shí)間超過(guò)70min，原料中的PE、PI等組分持續(xù)擴(kuò)散進(jìn)入酸醇之中，故PA含量逐漸下降，故理想的提取時(shí)間為70min。

（3）料液比對(duì)PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、酸醇比1.2:100、提取時(shí)間70min、提取次數(shù)1次、沉淀pH=7的條件下，考察料液比對(duì)PA提取效果的影響，結(jié)果見圖7。

如圖7所示，PA的含量與回收率皆隨著料液比的增加而上升。當(dāng)料液比達(dá)到1:20時(shí)，增長(zhǎng)放緩，至1:30時(shí)，PA含量達(dá)到最大。當(dāng)料液比小于1:30時(shí)，溶液濃度較高，PI、PE與PA競(jìng)爭(zhēng)性溶解擴(kuò)散入酸醇中，隨著料液比提高，傳質(zhì)動(dòng)力增加，PA擴(kuò)散速度加劇，顯著高于其他組分，故PA含量與回收率不斷增大；當(dāng)料液比達(dá)到1:30時(shí)，PA萃取溶解量最大，產(chǎn)品PA含量與回收率達(dá)到最高值；但料液比大于1:30時(shí)，少量的PI與PE逐漸擴(kuò)散進(jìn)酸醇萃取液中，故PA含量出現(xiàn)了下降，但回收率不變?；谫Y源最大化原則，最佳料液比為1:30。

（4）提取溫度對(duì)PA提取效果的影響

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取時(shí)間70min、提取次數(shù)1次、沉淀pH=7的條件下，考察提取溫度對(duì)PA提取效果的影響，結(jié)果見圖8。

如圖8，隨著溫度的升高，PA的含量和回收率上升至45℃時(shí)達(dá)到頂峰后迅速下降。溫度升高導(dǎo)致磷脂各成分分子運(yùn)動(dòng)加劇，利于磷脂分子向萃取液中的擴(kuò)散，故PA含量增幅不顯著。

當(dāng)溫度大于45℃后，磷脂易在高溫下結(jié)塊，增加了萃取PA的難度，PA的含量與回收率均下降顯著，故最適宜溫度為45℃。

（5）提取次數(shù)對(duì)PA提取效果的影響

在料液比l：30、酸醇比1.2:100、提取時(shí)間70min、提取溫度45℃、沉淀pH=7的條件下，考察提取次數(shù)對(duì)PA提取效果的影響，結(jié)果見圖9。

如圖9所示，隨著提取次數(shù)的增加，PA的含量出現(xiàn)輕微下降，1次可能已萃取出磷脂顆粒中絕大部分的PA，而隨著提取次數(shù)的增加，磷脂其他組分如PI和PE由于缺乏PA的競(jìng)爭(zhēng)性溶解也逐漸擴(kuò)散入酸醇中，后續(xù)與PA同時(shí)沉淀出來(lái)，造成含量下降，而回收率略有提升。故最佳的提取次數(shù)為1次。

(6)pH對(duì)PA分離效果的影響

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取時(shí)間70min、提取溫度45℃、提取次數(shù)1次的條件下，考察pH對(duì)PA沉淀效果的影響，結(jié)果見圖10。

如圖10所示，隨著pH的升高，PA含量整體呈現(xiàn)逐級(jí)上升的趨勢(shì)，至pH=8時(shí)達(dá)到最高。主要原因在于，PA為弱酸性物質(zhì)，在弱堿性條件下極易生成PA白色沉淀。蔣曉菲等的研究證實(shí)當(dāng)pH＞5時(shí)PA溶液中出現(xiàn)白色絮狀樣的固體沉淀，同時(shí)部分PI與PE也會(huì)析出，本實(shí)驗(yàn)中亦觀察到此現(xiàn)象。取沉淀溶于流動(dòng)性中，經(jīng)HPLC分析表明沉淀為少量PA與大量PE、PI的混合物。由于PA與PE、PI所帶電荷不同，PA帶有兩個(gè)負(fù)電荷，故在pH＜6時(shí)不易沉淀，優(yōu)先沉淀下來(lái)的是帶有負(fù)電荷較少的PE與PI。當(dāng)pH較低時(shí)，PA生成量有限，故沉淀中PA的含量和回收率都極低，大部分的PA仍然溶解在酸醇中，而隨著pH的增大，PA開始沉淀DTI。當(dāng)pH＞8后，PI和PE沉淀過(guò)多，故PA的含量有所下降。故最佳方法為先調(diào)節(jié)pH=5濾去雜質(zhì)，后調(diào)節(jié)pH=8沉淀PA。

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