3、響應(yīng)面法優(yōu)化PA分離工藝

（1）響應(yīng)面設(shè)計

根據(jù)單因素實驗，提取時間達到70min后，PA的含量和回收率都趨于平衡，故在設(shè)定提取時間為70min、提取1次、沉淀pH=8的前提下，根據(jù)Box-Behnken中心組合設(shè)計原理，將提取溫度(A)、料液比(B)和酸醇比(C)作為自變量，作三因素三水平響應(yīng)面分析，因素水平見表1，響應(yīng)面實驗設(shè)計及結(jié)果見表2。

由表2得二次多項回歸方程：

R=73.69+3.55A+3.22B+4.69C+1.32AB-0.71AC-0.78BC-5.44A²-2.10B²+2.99C²，其中R為PA純度，A為溫度，B為料液比，C為酸醇比。對二次多項回歸方程進行方差分析和顯著性檢驗，結(jié)果見表3。

該模型能解釋99.53％響應(yīng)者的變化，即該模型與實際實驗擬合良好，實驗誤差小。失擬項為0.1766，是不顯著的。這說明此模型完全可以用來預(yù)測PA的含量。校正決定系數(shù)為R²_Adj=0.9893，說明該回歸方程能夠較好地描述各因素與響應(yīng)值之間的真實關(guān)系。信噪比為45.099，說明二次模型的模擬具有較高可信度，可用此模型對設(shè)定條件下的PA含量進行預(yù)測。由F值檢驗可知各因素貢獻與為C＞A＞B，即乙醇酸濃度>溫度>料液比。

(2)驗證試驗

按照優(yōu)化后的條件結(jié)合實際情況，得到PA最佳提取溫度42℃，料液比1:37，酸醇比V_25％Hcl:V_無水乙醇=1.2:100，提取時間70min，提取1次。經(jīng)3次平行試驗，PA的含量均值為80.96％，得率為70.53％，其中PA含量與預(yù)測值(82.70％)相差1.74個百分點。

三、結(jié)論

使用脫糖粉末大豆磷脂為原料，采用響應(yīng)面法優(yōu)化酸性乙醇分離PA工藝，得到最佳工藝條件為：提取溫度42℃，料液比1:37，酸醇比V_25％HcI:V_無水乙醇=1.2:100，提取時間70min，提取次數(shù)1次，于pH=5時分離雜質(zhì)，再于pH=8時沉淀PA，此時產(chǎn)品含量為80.96％，回收率為70.53％。

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