一切正常牛乳中的尿素溶液成分約200－300mg/L，近些年，一些非法商戶(hù)為了能提升盈利室內(nèi)空間，在牛奶中添加尿素溶液過(guò)高蛋白質(zhì)含量，而濃度較高的尿素溶液會(huì)導(dǎo)致泌尿生殖系統(tǒng)代謝阻礙，造成人體電解質(zhì)溶液失調(diào)，對(duì)身體產(chǎn)生危害。因而，測(cè)量牛奶中尿素溶液的成分十分關(guān)鍵。

現(xiàn)階段，尿素溶液成分的檢查辦法具體有二乙酰一肟酶活性測(cè)定、流動(dòng)性注入檢測(cè)儀法、電化學(xué)發(fā)光法、液相色譜儀法等，對(duì)牛奶中尿素溶液的定量分析檢驗(yàn)方式較少。小編根據(jù)參照和參考游泳館水里尿素溶液成分的測(cè)量及牛奶前解決的方式 ，對(duì)牛奶中尿素溶液成分的測(cè)量開(kāi)展了研究和探尋論述，依據(jù)二乙酰一肟與尿素溶液的反映基本原理，對(duì)危害尿素溶液顯色反應(yīng)的試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)干了挑選科學(xué)研究，最終對(duì)該辦法的正確度、利用率及檢出限進(jìn)一步認(rèn)證，最后確認(rèn)該辦法可使用于牛奶中尿素溶液成分的檢驗(yàn)。

一、原材料與儀器設(shè)備

1.試驗(yàn)原材料。

試驗(yàn)用乳購(gòu)于商場(chǎng)中不一樣牌子的成袋奶及農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場(chǎng)市場(chǎng)銷(xiāo)售的散稱(chēng)奶。

2.關(guān)鍵儀器設(shè)備。

SP－756P紫外線(xiàn)由此可見(jiàn)光度計(jì)（上海市光譜儀器有限責(zé)任公司），普利賽斯ES225SM－DR電子分析天平（法國(guó)普利賽斯企業(yè)）。

3.實(shí)驗(yàn)試劑。

（1）尿素溶液國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（99.8％）：精確稱(chēng)量尿素溶液純品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)100mg，溶解0.05mol/L鹽酸中，輕輕地振搖，使尿素溶液徹底融解，并且于100mL容量瓶中滴定劑至標(biāo)尺，使最后濃度值為1000mg/L，攪拌后將其轉(zhuǎn)到深棕色瓶中，于－4℃冰柜中儲(chǔ)存預(yù)留。

（2）尿素溶液規(guī)范應(yīng)用液：汲取10.0mL的尿素溶液規(guī)范貯備液并且用純凈水稀釋液至100mL，使其含量為100mg/L。

（3）二乙酰一肟水溶液（0.5％）：稱(chēng)量5.0g二乙酰一肟并溶解水里，用容量瓶滴定劑至1000mL。

（4）三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實(shí)驗(yàn)試劑：將200mL的硫酸慢慢添加800mL水里，制冷后添加0.1g三氯化鐵和1.0g氨基硫脲，用純凈水滴定劑至1000mL。

（5）亞鐵氰化鉀水溶液（10.6％）：稱(chēng)量10.6g亞鐵氰化鉀，放水融解滴定劑至100mL。

（6）乙酸鋅水溶液（22.0％）：稱(chēng)量乙酸鋅22.0g，放水融解并添加5.0mL冰乙酸，滴定劑至100mL。

二、實(shí)驗(yàn)方法

1.實(shí)驗(yàn)原理。

二乙酰一肟在弱酸性情況下水解反應(yīng)轉(zhuǎn)換為雙乙酰，與尿素溶液在強(qiáng)堿標(biāo)準(zhǔn)下縮合反應(yīng)變成鮮紅色的二嗪化學(xué)物質(zhì)。該結(jié)合
物色調(diào)的深度與尿素溶液成分正相關(guān)，在光波長(zhǎng)525nm上有較大吸取峰。

2.測(cè)定法。

取攪拌試品10.0mL于100mL容量瓶中，添加亞鐵氰化鉀和乙酸鋅水溶液各4.0mL，用純凈水滴定劑，振搖均
勻。置放30min后，取10.0mL上清液，添加2.0mL二乙酰一肟水溶液，再添加三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實(shí)驗(yàn)試劑10.0mL，攪拌。將以上各管在開(kāi)水浴中加溫14min，置流動(dòng)性水里制冷2min，并且用純凈水稀釋液至
25mL。以純凈水作對(duì)照品，用1cm比色皿，于525nm光波長(zhǎng)處測(cè)量OD值值。

3.試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

（1）消化吸收光波長(zhǎng)的明確。加入適量標(biāo)液，在480nm－560nm范疇內(nèi)開(kāi)展全光波長(zhǎng)掃描儀，結(jié)果見(jiàn)圖1。

由圖1得知，吸光度值在480nm－525nm范疇內(nèi)慢慢提升，且在525nm處做到較大，在525nm－560nm范疇內(nèi)又慢慢減少，從而明確最好消化吸收光波長(zhǎng)為525nm。

（2）反映溫度的挑選。因?yàn)樵摲从吃诔貭顟B(tài)顯色反應(yīng)開(kāi)展得比較慢，故考慮到在升溫的水浴中開(kāi)展反映，各自將恒溫水浴鍋的溫度設(shè)定為60℃、70℃、80℃、90℃、100℃，觀(guān)查其顯色反應(yīng)，作出反映溫度與OD值的關(guān)系圖，詳細(xì)圖2。

由圖2能夠看得出，試品OD值受氣溫干擾很大，伴隨著氣溫的上升而持續(xù)擴(kuò)大，在溫度貼近100℃時(shí)，OD值做到最大，因此 挑選沸水浴加熱為最好的溫度標(biāo)準(zhǔn)。