2.2.2 蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)分析與剖析

根據(jù)線(xiàn)上PredictProtein軟件對(duì)AT遺傳基因不一樣復(fù)制編號(hào)的蛋白開(kāi)展亞細(xì)胞定位發(fā)覺(jué)2個(gè)蛋白質(zhì)均精準(zhǔn)定位在細(xì)胞核；TMHMM跨膜螺旋式區(qū)分析表明,2個(gè)蛋白質(zhì)均為膜外蛋白質(zhì)，無(wú)跨膜結(jié)構(gòu)工程。SOPMA構(gòu)造預(yù)測(cè)分析說(shuō)明,AT蛋白質(zhì)中，無(wú)規(guī)律打卷占有率最大,均在43%上下,次之為x-螺旋式,約占35%，拓寬鏈約占18%,β-拐角約占4%，兩蛋白質(zhì)有一定差別(表4)。

2.2.3 蛋白三級(jí)構(gòu)造預(yù)測(cè)分析與剖析

經(jīng)SWISS-MODEL同宗模型發(fā)覺(jué),114、148均融入酰谷丙轉(zhuǎn)氨酶實(shí)體模型,但其構(gòu)像略不一樣(圖1,2）。

2.3 過(guò)表達(dá)與RNAi影響資產(chǎn)重組質(zhì)粒圖譜

AT遺傳基因的2個(gè)復(fù)制114與148過(guò)表達(dá)重組質(zhì)粒見(jiàn)圖3-A。AT遺傳基因的2個(gè)復(fù)制114與148RNAi重組質(zhì)粒見(jiàn)圖3-B。

2.4 轉(zhuǎn)基因水稻擬南芥檢驗(yàn)

經(jīng)潮霉素挑選T0轉(zhuǎn)基因水稻擬南芥種籽后(圖4),對(duì)T1開(kāi)展pCambia1300-35s-114、pCambia1300-RNAi-114、pCambia1300-35s-148及pCambia1300-RNAi-148媒介潮霉素評(píng)定,結(jié)果顯示(圖5),目地質(zhì)粒T-DNA均已插進(jìn)擬南芥基因,說(shuō)明擬南芥轉(zhuǎn)基因水稻取得成功。

由表5得知,與野生型擬南芥種籽油酸各成份對(duì)比,影響114遺傳基因(114R)表述會(huì)造成 聚醚和脂肪酸成分極明顯的提升,提升力度分別為10.25%,38.33%,而軟脂酸和a亞麻酸是極明顯的降低,降低力度分別為10.57%,17.90%,明顯降低脂肪酸的成分,花生仁烯酸的成分也是有降低,可是差別不明顯；過(guò)表達(dá)114遺傳基因(35s-114)會(huì)造成 軟脂酸、脂肪酸和脂肪酸成分的明顯提升,提升力度各自做到15.52%,37.88%,12.33%,而聚醚、a亞麻酸和花生仁烯酸含萬(wàn)方數(shù)據(jù)量做到極明顯的降低,力度分別為50.22%,10.86%,29.93%。

在對(duì)飽和脂肪與不飽和脂肪剖析中,影響114遺傳基因會(huì)使飽和脂肪成分降低,對(duì)不飽和脂肪無(wú)明顯危害；過(guò)表達(dá)114遺傳基因會(huì)提升不飽和脂肪油酸的成分,而對(duì)飽和脂肪無(wú)明顯危害。