一切正常牛乳中的尿素溶液成分約200－300mg/L，近些年，一些非法商戶為了能提升盈利室內空間，在牛奶中添加尿素溶液過高蛋白質含量，而濃度較高的尿素溶液會導致泌尿生殖系統(tǒng)代謝阻礙，造成人體電解質溶液失調，對身體產(chǎn)生危害。因而，測量牛奶中尿素溶液的成分十分關鍵。

現(xiàn)階段，尿素溶液成分的檢查辦法具體有二乙酰一肟酶活性測定、流動性注入檢測儀法、電化學發(fā)光法、液相色譜儀法等，對牛奶中尿素溶液的定量分析檢驗方式較少。小編根據(jù)參照和參考游泳館水里尿素溶液成分的測量及牛奶前解決的方式 ，對牛奶中尿素溶液成分的測量開展了研究和探尋論述，依據(jù)二乙酰一肟與尿素溶液的反映基本原理，對危害尿素溶液顯色反應的試驗標準干了挑選科學研究，最終對該辦法的正確度、利用率及檢出限進一步認證，最后確認該辦法可使用于牛奶中尿素溶液成分的檢驗。

一、原材料與儀器設備

1.試驗原材料。

試驗用乳購于商場中不一樣牌子的成袋奶及農(nóng)貿批發(fā)市場市場銷售的散稱奶。

2.關鍵儀器設備。

SP－756P紫外線由此可見光度計（上海市光譜儀器有限責任公司），普利賽斯ES225SM－DR電子分析天平（法國普利賽斯企業(yè)）。

3.實驗試劑。

（1）尿素溶液國家標準物質（99.8％）：精確稱量尿素溶液純品國家標準物質100mg，溶解0.05mol/L鹽酸中，輕輕地振搖，使尿素溶液徹底融解，并且于100mL容量瓶中滴定劑至標尺，使最后濃度值為1000mg/L，攪拌后將其轉到深棕色瓶中，于－4℃冰柜中儲存預留。

（2）尿素溶液規(guī)范應用液：汲取10.0mL的尿素溶液規(guī)范貯備液并且用純凈水稀釋液至100mL，使其含量為100mg/L。

（3）二乙酰一肟水溶液（0.5％）：稱量5.0g二乙酰一肟并溶解水里，用容量瓶滴定劑至1000mL。

（4）三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實驗試劑：將200mL的硫酸慢慢添加800mL水里，制冷后添加0.1g三氯化鐵和1.0g氨基硫脲，用純凈水滴定劑至1000mL。

（5）亞鐵氰化鉀水溶液（10.6％）：稱量10.6g亞鐵氰化鉀，放水融解滴定劑至100mL。

（6）乙酸鋅水溶液（22.0％）：稱量乙酸鋅22.0g，放水融解并添加5.0mL冰乙酸，滴定劑至100mL。

二、實驗方法

1.實驗原理。

二乙酰一肟在弱酸性情況下水解反應轉換為雙乙酰，與尿素溶液在強堿標準下縮合反應變成鮮紅色的二嗪化學物質。該結合
物色調的深度與尿素溶液成分正相關，在光波長525nm上有較大吸取峰。

2.測定法。

取攪拌試品10.0mL于100mL容量瓶中，添加亞鐵氰化鉀和乙酸鋅水溶液各4.0mL，用純凈水滴定劑，振搖均
勻。置放30min后，取10.0mL上清液，添加2.0mL二乙酰一肟水溶液，再添加三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實驗試劑10.0mL，攪拌。將以上各管在開水浴中加溫14min，置流動性水里制冷2min，并且用純凈水稀釋液至
25mL。以純凈水作對照品，用1cm比色皿，于525nm光波長處測量OD值值。

3.試驗標準。

（1）消化吸收光波長的明確。加入適量標液，在480nm－560nm范疇內開展全光波長掃描儀，結果見圖1。

由圖1得知，吸光度值在480nm－525nm范疇內慢慢提升，且在525nm處做到較大，在525nm－560nm范疇內又慢慢減少，從而明確最好消化吸收光波長為525nm。

（2）反映溫度的挑選。因為該反映在常溫狀態(tài)顯色反應開展得比較慢，故考慮到在升溫的水浴中開展反映，各自將恒溫水浴鍋的溫度設定為60℃、70℃、80℃、90℃、100℃，觀查其顯色反應，作出反映溫度與OD值的關系圖，詳細圖2。

由圖2能夠看得出，試品OD值受氣溫干擾很大，伴隨著氣溫的上升而持續(xù)擴大，在溫度貼近100℃時，OD值做到最大，因此 挑選沸水浴加熱為最好的溫度標準。